AF568标记小麦胚芽凝集素(WGA)的应用场景与优势
发布时间:2025-11-12 09:01:27

  注:以下所介绍产品仅用于科研,来自西安齐岳生物小编wyh,我们可以提供相关产品的定制服务偶联机制:AF568的NHS酯在碱性条件(如碳酸氢钠缓冲液,pH 8.3-8.5)下与WGA的赖氨酸氨基发生亲核取代,形成稳定酰胺键。反应需避光、惰性气体保护,室温孵育1-2小时。染料-蛋白比例:推荐染料:蛋白摩尔比为5-10:1,避免过度标记导致蛋白变性或活性丧失。标记后复合物分子量约45-50 kDa,纯度≥95%。纯化方法:采用凝胶过滤(如Sephadex G-25)、透析或超滤(10 kDa截留)去除游离染料和副产物。通过SDS-PAGE验证标记效率,荧光成像显示标记条带位置。质控指标:HPLC/MS验证分子量及纯度;荧光光谱仪确认激发/发射波长;细胞结合实验验证WGA糖结合活性保留(如与GlcNAc包被板的结合能力)。细胞成像与定位:用于荧光显微镜、共聚焦显微镜观察细胞表面糖蛋白分布(如神经元、上皮细胞),追踪细胞迁移、增殖及凋亡过程。流式细胞术:检测细胞表面糖链表达水平,用于细胞分选、免疫表型分析及肿瘤细胞检测。组织切片分析:标记石蜡/冰冻切片中的糖基化结构,研究组织发育、肿瘤微环境及病理状态(如炎症、癌症)。活体成像:近红外荧光穿透力强,适用于活体动物模型中肿瘤、炎症部位的实时追踪。生物相容性:标记后WGA活性保留,不影响其生物学功能,适合活细胞/活体实验。